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中国小粒度纳米银粉颗粒在抗流感病毒中研究进展大家众所周知,纳米银粉具有良好的杀菌、抗病毒的效果,而我国科研人员近年亦在这方面进行了深入的研究,并取得一定进展。其中大连大学医学院的尹俭俭先生对纳米银抗3型副流感病毒作用较具代表性,以下研究数据及结论均为原文转载相应的论文文献。 纳米银抗3型副流感病毒作用及机制研究结果: 1、纳米银对MDCK的毒性作用及PIV3的毒力 纳米银粉对MDCK作用的较大无毒质量浓度( TC0) 为 25 mg /L[8], PIV3 对 MDCK 细胞作用的 TCID50为10-1.35 /mL。当纳米银浓度大于25 mg /L后,则开始控制MDCK生长。纳米银粉对MDCK的毒性作用主要表现为细胞颗粒增多,大小不均,增殖缓慢,细胞回缩、变圆、成串脱落死亡。纳米银对细胞的毒性作用随着纳米银溶液质量浓度的降低而降低,细胞存活率相应增加。 2、MTT法检测纳米银对PIV3的控制作用 结果表明,纳米银处理组( 直接灭活组,预防给 药组,治疗给药组) 的细胞存活率与病毒对照组相比,差异有统计学意义( P <0. 01) 。见表1。表1不同组 MTT 检测结果的比较 x ± s Tab 1 Comparison of MTT assay results in different groups 组别 MTT值细胞存活率直接灭活组0.8273 ±0.04 94.81 ±0.02 a 预防给药组 0.8120 ±0.04 93.05±0.05 a 治疗给药组 0.7882 ±0.01 90.32±0.02 a 正常细胞组 0.8727 ±0.04 —病毒对照组0.2470±0.05 25.50 ±0.06 纳米银对照组 0.8308 ±0.03 95.21±0.04 F 值 361. 542 332.327 P 值 <0.01 <0.01 a: P <0.01,与病毒对照组比较。 3、免疫荧光法检测纳米银对PIV3的控制作用 待 MDCK 在置有盖玻片的6 孔培养板上 层后,将纳米银和 PIV3 作不同的处理,封片,于倒置 显微镜下观察。如图1 所示,正常MDCK 组未见特异 性黄绿色荧光,细胞形态正常;病毒对照组和溶剂对 照组( 溶剂与 PIV3 混合组) 中, MDCK 均出现了很强的特异性黄绿色荧光,细胞肿胀变圆、间隙变大、细胞 死亡或脱落;预防用药组、直接灭活组、治疗用药组的细胞内特异性荧光均很少见,细胞形态变化不大,细 胞稍微回缩,但形态基本正常。 MTT 和免疫荧光的结果表明,纳米银能明显控制 PIV3 的侵入 有一定的阻断作用,对PIV3及其吸附有破坏作用 4、纳米银粉对神经氨酸酶活性的控制 不同质量浓度的纳米银( 75 mg /L和 37.5 mg /L) 分别与PIV3 相互作用 30 min 和 60 min,再孵育 10 min,纳米银对 PIV3 神经氨酸酶活性的抑 制率均高于 百分之80,而病毒对照组和溶剂对照组的 控制率均低于 百分之20( 图 2) 。神经氨酸酶催化唾液 酸与糖蛋白之间糖苷键的水解,协助病毒颗粒穿 过呼吸道黏液和促进子代病毒体脱离于感染细 胞[9]。上述结果表明,纳米银可以通过作用于 PIV3 神经氨酸酶药物靶点来阻断病毒对细胞的感染。 5、纳米银粉对 PIV3 粒子的破坏作用PIV3 液经透射电镜负染色后,可观察到正常形态特征。PIV3 与纳米银相互作用30min 后,其形态部分缺损; 相互作用 60 min,结构完全被破坏; 作用 120 min,病毒被破坏成更小的碎 片,形态已无法观察。见图 3。结果表明,纳米银 颗粒可能直接破坏 PIV3 的形态和结构。
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